根据病史、临床典型表现可作出临床诊断，加下列实验室检查中的其中一项即可确诊：
1、细胞学检查
以玻片在疱疹底部作印片，Wright-Giemsa染色，显微镜下见到具有特征性的多核巨细胞或核内嗜酸性包涵体，此法敏感性低。
2、病毒抗原检测
从皮损处取标本，以单克隆抗体直接免疫荧光试验或酶联免疫吸附试验检测HSV抗原，是临床常用的快速诊断方法。
3、病毒培养
取皮损处标本进行病毒培养、分离、鉴定、分型，是诊断HSV感染的金标准方法，但操作复杂，花费大。
4、核酸检测
已有报道应用核酸杂交技术及PCR技术诊断生殖器疱疹，可提高诊断的敏感性并可进行分型。