实验室检查
1、母子血型检查
检查母子ABO和Rh血型，证实有血型不合存在。ABO溶血病者母亲为O型，新生儿为A或B型。Rh溶血病者母亲为Rh阴性（D抗原阴性），新生儿为Rh阳性。如母亲为Rh阳性（但C或E抗原阴性，胎儿C或E抗原阳性），婴儿Rh阳性，也可发生抗E、抗C、抗e、抗C引起的溶血病。
2、检查有无溶血——血清胆红素
溶血时红细胞和血红蛋白细胞减少，早期新生儿血红蛋白<145g l="">6%）；血涂片有核红细胞增多（>10/100个白细胞）。血清总胆红素和未结合胆红素明显增加，溶血病患儿生后黄疸逐渐加深，胆红素水平呈动态变化，需每天随访2-3次。
3、致敏红细胞和血型抗体测定
（1）改良直接抗人球蛋白试验：即改良Coombs试验，是用“最适稀释度”的抗体人球蛋白血清与重复洗涤后的受检红细胞盐水悬液混合，如有红细胞凝聚为阳性，表明红细胞已致敏。该项检查是确诊实验。Rh溶血病其阳性率高而ABO溶血病阳性率低。
（2）抗体释放试验：听过加热使患儿血肿致敏红细胞血型抗体释放与释放液中，将与患儿相同血型的成人红细胞（ABO系统）或O型标准红细胞（Rh血型）加入释放液中致敏，再加入抗人球蛋白血清，如有红细胞凝聚为阳性。是监测致敏红细胞的敏感试验，也为确诊实验。Rh和ABO溶血病一般均为阳性。
（3）游离抗体试验：在患儿血清中加入与其他相同血型的成人红细胞（ABO系统）或O型标准红细胞（Rh系统）致敏，再加入抗人球蛋白血清，如有红细胞凝聚为阳性。表明血清中存在游离的ABO或Rh血型抗体，并可能与红细胞结合引起溶血。此项实验有助于估计是否继续溶血、换血后的效果，但不是确诊实验。
其他辅助检查：
1、X线检查 见胎头颅骨外软组织晕轮形成透明带，体形变胖，手足不能屈曲或有胎盘阴影增大。
2、超声检查 对诊断胎儿重度水肿并发腹水有帮助。用超声波检查如胎儿皮肤厚度超过5mm者即示胎儿水肿。超声监测可探及肝脾肿大和周围水肿，并可用经腹壁羊水穿刺检测胆红素在羊水中的存在。羊水中胆红素的增加，特别是结合超声证实肝脾肿大或水肿，提示预后危重，需要在超声引导下经腹壁输注红细胞，如果胎儿接近足月应尽快结束妊娠。